Après Lenski et al, voici Maeda et al.
Publié : 24 févr. 2009, 21:10
Maeda et al. Protein engineering of hydrogenase 3 to enhance hydrogen production. Applied Microbiology and Biotechnology. Mai 2008;79(1):77-86. Voir sur PUBMED.
En gros: Il semblerait qu'une équipe de chercheurs a produit une nouvelle variété de bactéries qui produisent 30 fois plus d'hydrogène en employant une technique basée sur les mutations aléatoires et la sélection naturelle (autrement dit, l'évolution biologique). Au lieux de localiser et modifier le gène concerné, ils ont augmenté la capacité de l'hôte à produire des mutations et sélectionné les variantes produisant un max d'hydrogène.
Résumé:
En gros: Il semblerait qu'une équipe de chercheurs a produit une nouvelle variété de bactéries qui produisent 30 fois plus d'hydrogène en employant une technique basée sur les mutations aléatoires et la sélection naturelle (autrement dit, l'évolution biologique). Au lieux de localiser et modifier le gène concerné, ils ont augmenté la capacité de l'hôte à produire des mutations et sélectionné les variantes produisant un max d'hydrogène.
Résumé:
Ça a l'air excitant non? Malheureusement, l'U de M ne veut pas me donner la version complète. Quelqu'un est arrivé à télécharger le PDF?The large subunit (HycE, 569 amino acids) of Escherichia coli hydrogenase 3 produces hydrogen from formate via its Ni-Fe-binding site. In this paper, we engineered HycE for enhanced hydrogen production by an error-prone polymerase chain reaction (epPCR) using a host that lacked hydrogenase activity via the hyaB hybC hycE mutations. Seven enhanced HycE variants were obtained with a novel chemochromic membrane screen that directly detected hydrogen from individual colonies. The best epPCR variant contained eight mutations (S2T, Y50F, I171T, A291V, T366S, V433L, M444I, and L523Q) and had 17-fold higher hydrogen-producing activity than wild-type HycE. In addition, this variant had eightfold higher hydrogen yield from formate compared to wild-type HycE. Deoxyribonucleic acid shuffling using the three most-active HycE variants created a variant that has 23-fold higher hydrogen production and ninefold higher yield on formate due to a 74-amino acid carboxy-terminal truncation. Saturation mutagenesis at T366 of HycE also led to increased hydrogen production via a truncation at this position; hence, 204 amino acids at the carboxy terminus may be deleted to increase hydrogen production by 30-fold. This is the first random protein engineering of a hydrogenase.
